目的 构建小鼠甲状腺转录因子-2（TTF-2）转基因动物表达载体（pBROAD3-TTF-2），观察其在小鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）中的表达。 方法 从C57BL/6J小鼠肝脏组织中提取基因组DNA，利用聚合酶链式反应方法扩增出TTF-2基因1 113 bp开放阅读框，通过DNA重组技术将TTF-2基因片段插入克隆载体pMD18-T中，经测序正确后，再重组于pBROAD3-mcs中，构建转基因动物表达载体pBROAD3-TTF-2，用酶切电泳分析对其进行鉴定。运用脂质体转染试剂将其转染BMSC后，蛋白质印迹法检测TTF-2基因的表达。 结果 ① DNA测序证实目的基因序列正确无突变，酶切电泳分析得到相应的目的片段，大小与理论计算值一致，成功构建转基因动物表达载体pBROAD3-TTF-2。② 蛋白质印迹法显示转染的BMSC高表达TTF-2蛋白。 结论 成功构建了pBROAD3- TTF-2转基因动物表达载体，显示其转染BMSC后TTF-2基因的表达，为下一步建立TTF-2转基因小鼠模型奠定了基础。